Форменные элементы крови эритроциты, тромбоциты, лейкоциты

Приложение 1. Ошибки при окраске препаратов крови, способы их устранения и основные дифференциально-диагностические признаки возбудителей малярии

Дефекты методики окрашивания препаратов крови по Романовскому-Гимза и их устранение

Внешний вид препарата

Вид окрашенных элементов крови и паразитов при микроскопировании

Меры предупреждения и исправления дефектов

Кислая реакция краски

Препарат макроскопически розового цвета

«Тонкий мазок» — эритроциты ярко-розовые, специфическая зернистость не выявляется, паразиты плохо различимы, ядра лейкоцитов и паразитов окрашены слабо, цитоплазма паразитов имеет розовый оттенок.

Проверить рН буферного раствора.

Препараты перекрасить после предварительного обесцвечивания.

Свежеприготовленные препараты — погрузить в дистиллированную воду, при сильном перекрашивании в воду добавить 1%-ный раствор уксусной кислоты (1 — 2 капли на 50 мл воды). Ранее приготовленные препараты — смочить ватный тампон смесью Никифорова, 1 — 2 раза осторожно провести по препарату. Сразу после обработки результат проконтролировать под сухой системой микроскопа (окуляр х 7, объектив х 40), в случае необходимости обработку повторить. Необходимо иметь в виду, что улучшить качество окраски возможно преимущественно в случае «тонкого мазка». «Толстые капли» плохо поддаются переокраске. При повторной окраске время окрашивания должно быть сокращено

«Толстая капля» — не достигается полный гемолиз эритроцитов. Интенсивно розовый фон. Ядра паразитов сливаются с цитоплазмой

Избыточно-щелочная реакция краски

Препарат макроскопически синего цвета без фиолетового оттенка

«Тонкий мазок» — эритроциты голубые или синие, зернистость пораженных эритроцитов выявляется с трудом. Ядра лейкоцитов и паразитов окрашены в синий цвет и с трудом отличимы от цитоплазмы.

Проверить рН буферного раствора или качество отмывки предметных стекол от щелочи; заведомо щелочные стекла (синего цвета) не использовать. В случае необходимости попытаться перекрасить препарат (см. меры предупреждения и исправления дефектов)

«Толстая капля» — все элементы имеют синюю окраску. Ядро и цитоплазма паразита дифференцируется с трудом

Недостаток азура в краске Романовского

Препарат макроскопически синего цвета

Азурофильные элементы окрашены плохо; отсутствует характерный фиолетово-красный цвет ядер паразитов и лейкоцитов, а также специфической зернистости пораженных эритроцитов

В рабочий раствор добавить синьку Мансона. Препараты дополнительно докрасить (см. меры предупреждения и исправления дефектов)

Препарат макроскопически бледный

Форменные элементы крови, их структуры и все структуры паразита бледные. Паразиты выявляются с трудом только по пигменту.

Докрасить «тонкий мазок» в течение 20 — 30 мин, толстую каплю в течение 10 — 15 мин

В «тонком мазке» специфическая зернистость эритроцитов плохо прокрашена или не прокрашена

Препарат макроскопически темно-фиолетовый

«Тонкий мазок» — ядра лейкоцитов чернильного цвета, бесструктурные, ядра паразитов часто неотличимы от темно окрашенной цитоплазмы.

В случае необходимости перекрасить препараты (см. меры предупреждения и исправления дефектов)

«Толстая капля» — паразиты становятся похожи на обломки ядер лейкоцитов

Аутофиксированная «толстая капля»

Препарат макроскопически имеет металлический оттенок

Гемолиз в процессе окраски не достигается.

Этот дефект неустраним. Для предупреждения следует:

Микроскопия таких препаратов практически невозможна. Плотный фон состоит из многослойно расположенных эритроцитов

1. Окрашивать свежеприготовленные «толстые капли»;

2. Исключить возможность аутофиксации «толстых капель» (см. п. 6.4.1)

Plasmodium vivax в «тонком мазке» крови

Формы, обнаруживаемые в периферической крови

Стадии развития бесполых форм (продолжительность эритроцитарной шизогонии — 48 часов)

Половые формы (гаметоциты)

Читайте также:  Психология болезней Ногти (проблемы)

Все формы эритроцитарной шизогонии. Интенсивность паразитемии редко превышает 20 тыс. паразитов в 1 мкл крови. При нарастании паразитемии синхронность утрачивается, характерен полиморфизм — одновременное наличие разных стадий бесполых форм и гаметоцитов. Встречается поражение одного эритроцита несколькими паразитами, но реже и в меньшей степени, чем при P. falciparum

Занимает 1/6, более взрослый — 1/4 эритроцита, форма правильная или несколько вытянутая. Ядро округлое, реже несколько вытянутое, относительно плотное. Вакуоль хорошо выражена. Цитоплазма часто с утолщением в одном из участков. Пигмент — отдельные нежные зерна, темно-коричневого цвета в разных участках цитоплазмы

Молодые занимают 1/3 — 1/2 эритроцита, более зрелые — значительную его часть. Цитоплазма разнообразной формы с псевдоподиями, отражающими присущую этим стадиям амебовидную активность — т.н. амебовидные трофозоиты. Ядро округлое или овальное, крупнее и менее плотное в сравнении с кольцевидными трофозоитами, расположено периферически. Наиболее молодые имеют несколько длинных тонких псевдоподий, количественно увеличивающиеся по мере роста, придавая паразиту причудливую форму. Вакуоль относительно крупная, встречается т.н. добавочная вакуоль — слияние концов 2-х псевдоподий при приготовлении и последующей фиксации мазка крови. Пигмент темно-коричневого цвета, расположен чаще диффузно в цитоплазме, иногда концентрируется вокруг вакуоли или по периферии паразита. По мере роста паразита вакуоль постепенно уменьшается, псевдоподии сглаживаются

Занимает значительную часть эритроцита округлой или овальной формы без псевдоподий и вакуоли, с относительно правильным очертанием. Ядро относительно крупное, рыхлое, чаще несколько вытянутое, иногда дугообразное. Цитоплазма занимает основную часть клетки. Пигмент хорошо выражен, наряду с диффузным расположением, концентрируется по периферии паразита. Может начинать группироваться в отдельные скопления

Занимает значительную часть эритроцита. В неразделившейся цитоплазме от 2 до 18 — 20 (в среднем 14 — 16) ядер, уменьшающихся в размере. По мере деления ядер пигмент концентрируется в отдельные скопления

Занимает почти весь или весь эритроцит. 18 — 20 (в среднем 14 — 16) относительно мелких мерозоитов, расположенных асимметрично по отношению к пигменту, собранному в одно плотное скопление. Мерозоит округлой или овальной формы не свыше 2 ЦК в диаметре, ядро мелкое и плотное, расположено центрально или симметрично

Округлый или овальный, занимает весь пораженный эритроцит. Ядро относительно плотное, округлое или вытянутое, расположено асимметрично, реже в центре клетки. Цитоплазма окрашена в более интенсивный сине-голубой цвет в сравнении с бесполыми формами, вакуоли нет. Иногда вокруг ядра — зона просветления розоватого тона или даже почти бесцветная — менее интенсивное скопление хроматина по периферии ядра. Размер ядра варьирует. Пигмент — обильный, мелкие интенсивно окрашенные гранулы или грубые зерна, рассеянные по цитоплазме. Иногда трудно дифференцировать со взрослыми трофозоитами

Несколько уступает в размерах женскому гаметоциту. Ядро крупное, рыхлое с просветлениями, без четких границ, иногда различимо с трудом. Имеет более светлую и яркую окраску в сравнении с женским гаметоцитом. Цитоплазма бледно-голубого или серого цвета, иногда с розовым оттенком. Пигмент — мелкие обильные гранулы или грубые зерна яркой коричневой окраски, рассеяны по цитоплазме с тенденцией к концентрации вокруг ядра

Начиная со стадии развивающегося трофозоита и гаметоцита, паразит превышает размеры эритроцита. Изредка могут встречаться кольца с двойным ядром (см. таблицу «Р falciparum «) и напоминающие лентовидные формы (см.таблицу «P. malariae»)

Plasmodium falciparum в «тонком мазке» крови

Формы, обнаруживаемые в периферической крови

Окраска цитоплазмы крови человека

Изучение форменных элементов крови

Читайте также:  Биохимические маркеры инфаркта миокарда 1

1. Особенности изучения темы «Кровь»
на практическом занятии по гистологии

Пособие составлено с учётом особенностей преподавания гистологии на очном и заочном отделениях факультета ветеринарной медицины НГАУ. В нем отражены вопросы, наиболее часто задаваемые студентами и вызывающие наибольшие затруднения.

К данным особенностям можно отнести следующее.

1. Изучение мазков крови человека, а не сельскохозяйственных животных . Это связано с наличием учебных препаратов «Мазок крови человека», которыми централизованно снабжались высшие учебные заведения. Кроме того, строение форменных элементов крови большинства видов сельскохозяйственных животных и человека имеет значительное сходство. Поэтому, в случае освоения навыков работы с препаратами крови человека, дальнейшая работа с мазками крови животных не вызовет затруднений.

2. Работа с препаратами, окрашенными гематоксилином и эозином. Данная особенность также связана с наличием учебных препаратов, окрашенных гематоксилином и эозином, а не по методу Романовского-Гимзы, по которому принято окрашивать мазки крови в диагностических лабораториях.

Препараты крови, окрашенные по методу Романовского-Гимзы, имеют некоторые отличия от препаратов, окрашенных гематоксилином и эозином. Общим для двух методов является окрашивание эритроцитов в розовый цвет, ядер лейкоцитов – в синий. Отличия касаются окраски цитоплазмы лейкоцитов: в первом случае она серо-голубая (чем больше РНК содержится в цитоплазме, тем больше преобладает синий цвет), во втором – розовая. Преимуществом окраски по методу Романовского-Гимзы является лучшее выявление зернистости в цитоплазме гранулоцитов. Однако навыки идентификации лейкоцитов, окрашенных гематоксилином и эозином, также необходимы морфологу, поскольку в большинстве гистологических исследований препараты окрашивают гематоксилином и эозином. Определение вида лейкоцитов в тканях в ходе гистологического исследования часто имеет диагностическое значение.

Помимо особенностей окраски, в гистологических препаратах форменные элементы крови имеют иную форму, поскольку они не распластаны на стекле, а находятся свободно либо бывают сдавлены окружающими структурами. На рис. 1-3 представлены ситуации, когда от выявления лейкоцитов определённого вида в исследуемых тканях зависит постановка диагноза.

Представленные в пособии фотографии выполнены с препаратов, окрашенных гематоксилином и эозином (за исключением рис. 21 и 40).

Рис. 1. Печень кролика при паразитарном поражении. В печени содержится большое количество лейкоцитов с яркими розовыми гранулами в цитоплазме

Рис. 2. Печень крысы при остром алкогольном гепатите. В центральной части фотографии видно скопление мелких тёмных клеток – лимфоцитов

Рис. 3. Лимфатический узел собаки при гнойном лимфадените. Препарат содержит множество сегментоядерных нейтрофильных гранулоцитов

3. Работа без иммерсии. Изучение морфологии форменных элементов крови рекомендуют проводить при 900-1500-кратном увеличении. Данное увеличение получают при помощи иммерсионных объективов. В диагностических лабораториях подсчёт лейкоцитарной формулы также выполняют с использованием иммерсионных объективов. На практических занятиях по гистологии микроскопированием с иммерсией пользуются редко, поскольку неполное удаление иммерсионного масла ведёт к порче объектива. Обычно на практических занятиях препараты рассматривают при помощи неиммерсионных объективов при 400-600-кратном увеличении. Данного увеличения вполне достаточно для уверенной идентификации клеток (в случае знания их морфологии). Кроме того, гистологические исследования, в ходе которых определяют виды лейкоцитов в тканях, также проводят без использования иммерсии.

Для увеличения сходства фотографий, представленных в пособии, с картиной, наблюдаемой в микроскоп на практическом занятии, все фотографии выполнены без иммерсии. Площадь препарата, представленная на фотографиях, примерно соответствует полю зрения учебного микроскопа. С этой же целью поля зрения выбраны случайным образом, кадрирования и улучшения качества изображений не проводилось, фотографии содержат изображения артефактов, имеющихся в учебных препаратах.

Читайте также:  Choline Inositol — что это такое, состав и польза препарата, способ применения и дозы

© Новосибирский государственный аграрный университет, 2011

© ГНУ Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО Россельхозакадемии, 2011

Подписпна в печать 10.04.2011, Издат. №171 (УДК 619:611.018 (075); ББК 48.32, я 73; К 143)

Окраска цитоплазмы крови человека

Препарат 2.

Мазок крови. Окраска по Романовскому.

(Нижеследующее описание основывается на материале темы 8)

А. Эритроциты

а) На препарате основная часть форменных элементов крови представлена эритроцитами (которых примерно в 1000 раз больше, чем лейкоцитов).

Поэтому в этом поле зрения мы не видим других клеток, кроме эритроцитов.

б) Эритроциты отличаются характерной морфологией:

лишены ядер (а также почти всех остальных органелл) ,

имеют на препарате округлую форму и относительно постоянный диаметр ,

э озином окрашиваются в розовый цвет ,

в центре — более светлые, что объясняется формой клеток — в виде двояковогнутого диска.

в) Примерно 25% объёма эритроцита занимают молекулы гемоглобина , с которыми связана основная функция эритроцитов —

перенос кислорода от лёгких к тканям.

Б. Нейтрофильные гранулоциты

2. Ядро состоит из нескольких ( обычно 3-4) связанных друг с другом сегментов .

специфические (нейтрофильные, фиолетово-розового цвета), содержащие антибактериальные вещества,

и неспецифические (производные лизосом).

4. Нейтрофилы являются микрофагами :

убивают и затем фагоцитируют микроорганизмы.

2. В отличие от предыдущего случая, ядро ещё не сегментировано,
а имеет форму изогнутой палочки.

В. Базофилы

2. В цитоплазме — гранулы двух типов:

мелкие неспецифические и

(в большом количестве) крупные базофильные (фиолетово-вишнёвого цвета ), содержащие

в)

медиатор воспаления гистамин и
противосвёртывающее в-во гепарин .

3. Благодаря этому, базофилы способствуют развитию воспалительных и аллергических реакций.

Г. Эозинофилы

2. Его ядро обычно состоит из двух сегментов.

3.а) В цитоплазме вновь — гранулы 2-х видов:

неспецифические, а также

специфические оксифильные, окрашенные эозином в розовый цвет .

кристаллоидные структуры (образующиеся из т.н. щелочного белка) и

ферменты инактивации гистамина.

4. В итоге, эозинофилы обладают двумя видами активности:

антигистаминной (т.е. противовоспалительной и антиаллергической), а также

противопаразитарной (видимо, за счёт щелочного белка).

Д. Лимфоциты

небольшие размеры,
крупное ядро, занимающее основную часть клетки,
узкий ободок базофильной цитоплазмы.

специфические иммуноглобулины,
благодаря которым клетки участвуют в иммунных реакциях.

б) По своей функции в этих реакциях (и по виду поверхностных антигенных белков) лимфоциты подразделяются на несколько популяций:

В-клетки (после стимуляции превращаются в плазмоциты , секретирующие антитела),

Т-хелперы (резко усиливающие ответ В-клеток),
Т-киллеры (убивающие чужеродные клетки) и др.

они более, чем вдвое, крупнее окружающих эритроцитов;

ядро — бобовидное,
а цитоплазма имеет вид светлого широкого ободка .

превращаются в макрофаги (в т.ч. во многие их разновидности).

б) В качестве макрофагов они участвуют

в фагоцитозе и
в иммунных реакциях (перерабатывают и представляют антигены лимфоцитам)

Ж. Тромбоциты

(Кроме них, виден также палочкоядерный нейтрофил (2)).

2. Тромбоциты — безъядерные фрагменты цитоплазмы, отделившиеся в костном мозгу от мегакариоцитов.

ж)

центральную часть — грануломер (с мелкой базофильной зернистостью)

и периферическую часть — гомогенный гиаломер .

4. Тромбоциты участвуют в свёртывании крови — благодаря тому, что

в их гранулах содержится один из факторов свёртывания,
а с поверхностью тромбоцитов могут связываться другие факторы (что ускоряет протекание ключевых реакций свёртывания).

Ссылка на основную публикацию
Фолликулы в яичниках этапы созревания, воспаление, диагностика и лечение
Фолликулы в яичниках. Норма количество в 30-40-50 лет, при беременности, менопаузе, размеры Способность женщины к беременности определяется фолликулами в яичниках,...
Фитнес, остеохондроз, кальций, здоровье позвоночника, диета при остеохондрозе — Фитнес
Университет Некий терапевт с 50-летним стажем как-то заметил: «Когда начинал работать, на участке не было ни одного молодого пациента с...
Фитолизин — купить в аптеке Вита Санкт-Петербург
Фитолизин паста 100 г Фитолизин паста 100 г Доступность: Есть в наличии Доставка Курьером Самовывоз Доставка Новой почтой Доставка УкрПочтой...
Фолликулярная киста яичника и беременность можно ли забеременеть
Беременность при фолликулярной кисте яичника Фолликулярная киста яичника – это полостное доброкачественное образование, которое располагается внутри органа и заполнено прозрачной,...
Adblock detector