Фрагментация ДНК спермограммы сущность, условия, расшифровка

Что такое фрагментация ДНК спермограммы, как ее сдают и какова цена анализа

Фрагментация ДНК сперматозоидов – это показатель, который начали исследовать относительно недавно. Однако такое исследование стало настоящей революцией в сфере определения причин мужского бесплодия. Анализ помогает определить полноценность генетического материала в сперматозоидах, требует специальных реагентов, а также хорошего технического оснащения лаборатории, поэтому стоимость такого исследования довольно высока. В данной статье мы обсудим суть проводимого анализа, его цену, условия сбора материала, возможную расшифровку получаемых результатов.

Отличие от спермограммы

Многие люди привыкли полагать, что наличие или отсутствие бесплодия определяет спермограмма. На деле же показатели, ею отображаемые, сильно отличаются от анализов на фрагментацию. В спермограмме отражается качественный и количественный состав эякулята, его объем, физические характеристики. В тестах на ДНК определяется количество сперматозоидов, которые несут качественный генетический материал, а значит, количество половых клеток, способных образовать полноценную зиготу с яйцеклеткой.

В некоторых источниках данные исследования подаются как «фрагментация ДНК спермограммы». Такое название считается ошибочным, поскольку никакой взаимосвязи анализ на ДНК со спермограммой не имеет. Даже сбор материала осуществляется для каждого исследования по отдельности.

Назначение исследования

Фрагментация ДНК сперматозоида – это процесс разрыва цепочек ДНК, которые содержатся внутри его головки, выполняя основную роль половой клетки – передачу генетического материала. Данный процесс считается патологическим, поскольку влияет на возможность зачатия, нормального развития эмбриона, успешность вынашивания ребенка.

Оплодотворение яйцеклетки фрагментированным сперматозоидом фактически не дает нормальной зиготы, а если зачатие случилось, то начинаются проблемы с присоединением плаценты, развитием эмбриона. Как следствие, часто случаются выкидыши.

При этом содержание сперматозоидов в эякуляте не нарушается, иные показатели спермограммы также остаются нормальными. Единственное отклонение общего анализа спермы, которое иногда замечается при фрагментированности клеток, – это показатели нормальной морфологии клеток.

Кому показано

Тест на фрагментацию сдается при невозможности объективно установить причину отсутствия у пары детей с помощью обычных анализов. Поводом для исследования также могут стать:

  • Беспричинное бесплодие.
  • Многократные выкидыши.
  • Возраст мужчины после 45 лет.
  • Варикоцеле.
  • Подготовка к процедуре ЭКО или ИКСИ.
  • Плохие показатели морфологии клеток, отражаемые спермограммой.

Исследование нужно провоодить при варикоцеле.

Разновидности тестов

Сдать анализ на фрагментацию ДНК сперматозоидов можно в частных поликлиниках, лабораториях, а также в центрах планирования семьи. Учитывая то, что для проведения теста используются различные методы, пациентам приходится выбирать, но на результат выбора чаще влияет не суть или эффективность методики, а цена проводимого исследования.

Halosperm тест являет собой исследование хроматина сперматозоидов. Этим тестом отображается не уже имеющиеся нарушения структуры ДНК, а склонность цепочек к денатурализации, поэтому прогнозирующую способность данного теста нельзя назвать достаточно высокой. Цена его составляет около 4500-5000 рублей.

TUNEL-тест – инновационная методика тестирования спермиев на фрагментацию ДНК. Путем смешивания специального энзима с исследуемым материалом и последующим его рассмотрением под микроскопом удается проанализировать соотношение фрагментированных клеток относительно здоровых. Разница видна сразу, поскольку фрагментированный сперматозоид выглядит четко окрашенным определенным цветом, а здоровая клетка распределяет энзим как внутри себя, так и вокруг.

Результаты TUNEL-теста имеют высокую прогнозирующую способность. Сама методика считается максимально точной для таких исследований. Цена анализа составляет приблизительно 10000 рублей, хотя некоторые лаборатории предлагают сниженную цену – 7500-8000 рублей.

Как собрать материал?

Готовиться к исследованию на фрагментацию половых клеток мужчине нужно так же, как и к проведению спермограммы, а именно:

  1. Три дня соблюдать половой покой.
  2. Отказаться от бани, горячего душа, тесного белья.
  3. Исключить употребление алкоголя, никотина, лекарственных средств.

Где собирать материал, решает сам пациент, но отдать свое предпочтение лучше именно лабораторным условиям, для сохранения чистоты материала, а также его целостности, ведь когда на улице температура -30°С, то избежать замораживания контейнера чрезвычайно тяжело. Воздействие высокими или низкими температурами может стать причиной получения недостоверных данных.

Перед сдачей анализов следует отказаться от бани и горячего душа.

Инструкция сбора спермы для анализа фрагментации и спермограммы одинакова: необходимо добиться эякуляции вручную, поместить семенную жидкость внутрь стерильного пластикового контейнера, не касаясь его внутренних стенок, и сдать на исследование на протяжении часа после сбора.

Сдав анализ единожды, необходимо быть готовым к повторной его сдаче, ведь показатели по истечении некоторого отрезка времени могут отличаться из-за устранения причины фрагментации или изменений условий жизни. Чаще всего повторно сдают анализ мужчины после 30 лет, имеющие вредные привычки.

Как читать результаты

Результаты анализов пациент получает на руки, поэтому имеет возможность рассмотреть показатели самостоятельно. Уровень фрагментации ДНК сперматозоидов отображается в процентах, а расшифровывается следующим образом:

  • До 15% – возможно естественное оплодотворение.
  • 15-25% – естественное оплодотворение затруднено.
  • Фрагментация превысила 30% – показание для ЭКО.
  • Количество спермиев с разрывами ДНК превысило 50% – показание для ИКСИ.
  • Фрагментация больше 60% – показание для использования донорского материала.

Фрагментация у здоровых мужчин обычно не превышает 15%. Даже если фрагментированный спермий попадает в яйцеклетку, она может самостоятельно восстановить поврежденную структуру его ДНК. Наилучшая способность к этому сохраняется у молодых будущих матерей. Стоит отметить, что при фрагментированных ДНК в сперматозоидах до 30% естественное оплодотворение считается возможным, но оно может занять достаточно длительное время, поэтому паре лучше запастись терпением.

Если показатель будет превышать этот порог, то лучше прибегнуть к методам искусственного оплодотворения. Методика ИКСИ позволяет выбрать сперматозоид для оплодотворения с нормальной структурой ДНК, что уменьшает риски выкидышей или аномалий развития эмбрионов.

Как видно из изложенного выше материала, спермограммы не всегда достаточно для точного определения причины бесплодия пары. Благодаря развитию науки нынче можно заранее определить возможность мужчины нормально зачать ребенка, а также предпринять необходимые меры в случае нарушения или утери такой возможности.

Читайте также:  Коронарит причины, симптомы, диагностика, лечение

Что такое фрагментация ДНК в сперматозоидах

Тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов

Адрес лаборатории: Москва, ул. Беговая, д. 7 стр. 2

+ Записаться на прием

Содержание:

  1. Причины фрагментации
  2. Типы тестов и подготовка к исследованию
  3. Расшифровка результатов
  4. Лечение

Одной из причин мужского бесплодия является нарушение целостности цепочек ДНК, в которых заложена генетическая информация о будущем ребенке. В эякуляте каждого мужчины содержится определенный процент сперматозоидов с поврежденной ДНК. Если уровень фрагментации ДНК сперматозоидов находится в норме (не превышает порогового значения в 15%), вероятность зачатия высока, и пара радуется наступившей беременности, даже не подозревая о возможных проблемах. Но вдруг что-то идет не так, и беременность прерывается. Если это происходит раз за разом, обоим партнерам необходимо пройти обследование.

Нарушение целостности структуры нуклеиновых цепочек приводит к образованию обрывков молекулы ДНК, что и называется фрагментацией. Чем выше содержание сперматозоидов с фрагментацией ДНК, тем меньше шансов на естественное зачатие. В случае если оно все же произошло, велика вероятность развития у ребенка онкологических заболеваний и генетических нарушений.

Причины фрагментации

Разрывы цепочек ДНК могут возникнуть под воздействием внешних и внутренних факторов.

Внутренние факторы, приводящие к нарушению целостности цепочек ДНК, можно условно разделить на две большие группы: сбой в механизме отбраковки и нарушение созревания сперматозоидов.

Формирование сперматозоидов с нарушениями ДНК вовсе не повод для беспокойства. В большинстве случаев дефектные клетки отбраковываются и удаляются из организма. Но если этот механизм дает сбой, концентрация дефектных клеток возрастает, что неизбежно ведет к проблемам с зачатием.

Другой причиной высокого содержания сперматозоидов с фрагментацией ДНК может быть неадекватное вызревание, приводящее к конденсации хроматина клеточного ядра и снижению содержания протаминов, обеспечивающих стабильность молекулы ДНК.

К внешним факторам относятся:

  • рентгеновское облучение и химиотерапия;
  • варикоцеле;
  • воздействие высоких температур;
  • некоторые хронические заболевания, а также инфекционно-воспалительные процессы;
  • оксидативный стресс;
  • злоупотребление алкоголем и табаком;
  • неблагоприятная экологическая обстановка;
  • психоэмоциональные нарушения, стресс.

Типы тестов и подготовка к исследованию

Для оценки фрагментации ДНК разработано несколько видов тестов. Наиболее популярные из них следующие:

  • TUNEL-тест. Для выявления повреждений нуклеиновых цепочек используется оптический эффект. Образец спермы смешивается с энзимом, маркированные нуклеотиды которого встраиваются в поврежденные сегменты цепочек. Поврежденные сперматозоиды приобретают окраску (при исследовании по методу светлого поля) или подсвечиваются (при флуоресцентном методе), после чего их можно подсчитать и вычислить индекс фрагментации — процент поврежденных клеток по отношению к общему количеству. Референсное значение для tunel-теста составляет 15%;
  • HALOSPERM-тест (метод SCD). Основное отличие от предыдущего метода состоит в подсчете клеток не имеющих повреждений. Тест отличается высокой чувствительностью;
  • SCSA-тест. Клетки подсвечиваются лазерным лучом и в зависимости от степени повреждений приобретают характерную окраску: зеленый — повреждений нет, желтый — незначительные нарушения, красный — серьезные дефекты. Референсное значение составляет 20%.

Забор материала для исследования производится так же, как и для обычной спермограммы, методом мастурбации. Чтобы результаты были максимально точными, рекомендуется сдавать сперму в клинических условиях в стерильную посуду.

При подготовке к тесту нужно соблюсти несколько условий:

  • соблюдать воздержание 3–5 дней;
  • отказаться от приема алкоголя и сильнодействующих веществ;
  • не рекомендуется посещать баню или сауну, а также проводить долгое время на пляже. При следовании в лабораторию в автомобиле не следует пользоваться функцией подогрева сиденья;
  • желательно избегать стрессовых ситуаций;
  • не следует проводить исследование, если в течение предшествующих двух недель приходилось принимать антибиотики;
  • после перенесенного заболевания, сопровождающегося повышением температуры, желательно выждать не менее двух недель.

Расшифровка результатов

Результат исследования оформляется в табличной форме, где приведен полученный результат в процентах и указано референсное значение для данного вида теста.

Для TUNEL-теста расшифровка выглядит следующим образом:

  • низкая степень фрагментации ДНК сперматозоидов (15–30%) — зачатие возможно, хотя и затруднено;
  • фрагментация ДНК сперматозоидов повышена незначительно и составляет 30–50% — естественное зачатие маловероятно, но хорошие результаты прогнозируются для ЭКО;
  • 50–60% — возможно только искусственное зачатие с невысокой степенью вероятности;
  • более 60% — зачатие при помощи собственного семенного материала маловероятно.

Ниже приведена интерпретация результатов HALO-теста:

  • степень фрагментации ДНК сперматозоидов менее 20% — вероятность естественного зачатия высокая;
  • 20–30% — вероятность зачатия стабильна, но есть риск замирания беременности и выкидыша;
  • 30–50% — естественное зачатие маловероятно, рекомендуется прибегнуть к процедуре ЭКО;
  • 50–60% — рекомендуется процедура ИКСИ;
  • повышенное содержание сперматозоидов с фрагментацией ДНК более 60% — рекомендуется воспользоваться донорской спермой.

Лечение фрагментации ДНК сперматозоидов

Фрагментация ДНК может не являться симптомом заболевания. В данном случае корректно говорить о патологическом состоянии. Если патология вызвана какими-либо внешними причинами, целесообразно устранить их насколько это возможно в конкретном случае. Зачастую улучшить параметры эякулята можно, например, при смене рода деятельности, изменении условий жизни, отказе от внешних привычек, излечении от инфекционного заболевания и т. д.

Если у пациента диагностирована фрагментация ДНК сперматозоидов высокой степени, назначается лечение при помощи антиоксидантной терапии. Для снижения концентрации сперматозоидов с поврежденной ДНК рекомендуется частый секс.

Многие пары сталкиваются с проблемой отсутствия зачатия или невынашивания беременности. До недавних пор бытовало мнение, что вся ответственность за это лежит на женщине. Некоторые полагают, что раз оплодотворение произошло, вся дальнейшая ответственность лежит на женщине. Это не совсем так. Сегодня медицина пришла к выводу, что в основе почти половины случаев бесплодия лежит так называемый “мужской фактор”.

Читайте также:  Центр эстетической стоматологии на Чистых Прудах отзывы, Москва, Малый Харитоньевский пер, д

Чтобы обезопасить будущего ребенка и с радостью провести время в ожидании его появления на свет рекомендуем еще на этапе планирования беременности пройти обследование обоим партнерам.

Фрагментация ДНК сперматозоидов

Фрагментация ДНК сперматозоидов

Для зачатия и рождения здорового ребенка важную роль играет генетика. Генетический материал от отца несут сперматозоиды. Что такое фрагментация ДНК сперматозоидов? Обязательно ли сдавать этот анализ? И что делать, если она повышена? Рассказывает специалист лаборатории сперматологии Сэм.

Согласно Всемирной Организации Здравоохранения (2000г.) около 10-20% супружеских пар репродуктивного возраста бесплодны, в половине случае из которых, причиной этого является мужской фактор. Для зачатия ребенка, протекания беременности без осложнений и рождения здорового потомства большую роль играет генетика, а именно тот генетический материал, который родители передадут своему будущему ребенку. Генетический материал от отца несут в себе мужские половые клетки сперматозоиды. Но как проверить, что в них не повреждена молекула ДНК? В настоящее время, особенно с повышенным применением ВРТ (вспомогательных репродуктивных технологий), в клиническую практику все увереннее входят анализы оценки генетического материала человека. Сдать анализ фрагментации ДНК сперматозоидов можно у нас влаборатории ЦИР!

Спермограмма и фрагментация ДНК сперматозоидов

Что такое фрагментация ДНК сперматозоидов?

Известно, что молекула ДНК состоит из двух спирально закрученных нитей (цепей). Однако под воздействием различных факторов молекула ДНК может повреждаться, в результате чего образуются разрывы, которые могут быть двухцепочечными или одноцепочечными. Разрывы (фрагменты) цепи ДНК нарушают целостность молекулы и, тем самым, снижают шансы наступления и благоприятного протекания беременности.

Рис. 1. Одно- и двухцепочечные разрывы молекулы ДНК.

Ферменты яйцеклетки после оплодотворения могут исправлять до 10% этих повреждений ДНК сперматозоидов, но это будет зависеть от типа повреждения и качества яйцеклетки. Остальные неисправленные разрывы ДНК ведут к нарушению генома эмбриона и остановке развития беременности на ранних сроках, в т.ч. на ранних этапах эмбриогенеза, особенно при применении метода ЭКО (экстракорпорального оплодотворения).

Исследование фрагментации ДНК сперматозоидов представляет собой определение процентного содержания сперматозоидов (индекса фрагментации) с нарушенной целостностью молекулы ДНК.

К чему приводит повышение уровня фрагментации ДНК сперматозоидов?

Сперматозоиды с поврежденной ДНК могут сохранять способность к оплодотворению, но в дальнейшем в эмбриональном развитии плода могут происходить нарушения, часто приводящие к прерыванию беременности. Иногда повреждения ДНК столь значительны, что эмбрион погибает на ранних этапах развития, при которых неудается даже выявить биохимические маркеры беременности. При повышении уровня фрагментации ДНК сперматозоидов снижается частота наступления беременности, увеличивается вероятность спонтанного аборта, а также снижается вероятность успеха ЭКО.

Фрагментация ДНК сперматозоидов и мужское бесплодие в мировых исследованиях

Рис.2. Историческая хронология развития изучения ДНК фрагментации (Rex, A.S., Aagaard, J. and Fedder, J., 2017. DNA fragmentation in spermatozoa: a historical review. Andrology, 5(4), pp.622-630).

Впервые значительную связь между повреждением ДНК сперматозоидов и невынашиванием беременности показали Robinson с соавторами (Великобритания, 2012).

В канадском исследовании авторов Zini A., Albert O., Robaire B в 2014г. было показано, что повышенная фрагментация ДНК сперматозоидов приводит к уменьшению мужского потенциала фертильности, снижению частоты наступления беременности, неразвивающейся беременности, а также снижению эффективности ВРТ. Кроме того, при оплодотворении таким дефектным сперматозоидом увеличивается вероятность наличия хромосомных нарушений и врожденных пороков развития у плода.

К 2015 г. было опубликовано значительное количество литературы о связи между повышенной фрагментацией ДНК и бесплодием, и в этом же году впервые поднимается вопрос о включении теста на фрагментацию ДНК сперматозоидов в перечень рутинных методов диагностики мужского бесплодия.

Все новые и новые исследования говорят о связи между повышенной фрагментацией ДНК сперматозоидов и невынашиванием беременности (Coughlan и соавторы, Великобритания 2015г.; Leach и соав., Австралия, 2015г.; Bareh и соавт., США, 2016г.; Zidi Jrah и соав., Тунис, 2016г.).

Результаты исследования Dorostghoal и др. показали значительно более высокий уровень сперматозоидов с фрагментированной ДНК у бесплодных мужчин, чем у контрольной группы фертильных мужчин. Фрагментация ДНК сперматозоидов, может служить, как новый маркер качества сперматозоидов.

В исследовании Гентского университета Бельгии авторами во главе Comhaire в 2018г. у бесплодных пар была выявлена диагностическая корреляция между индексом фрагментации ДНК сперматозоидов и результатами программ ВРТ. А также Deng и соавторы Научного центра репродуктивной медицины в Китае исследовали 1133 цикла ВРТ и выявили статистическую корреляцию между повышенным индексом фрагментации ДНК и негативным результатом программ ВРТ.

Показания к сдаче анализа

Сдать анализ на фрагментацию ДНК сперматозоидов рекомендуется в следующих случаях:

  • * бесплодие в супружеской паре;
  • * привычное невынашивание беременности;
  • * подготовка к вспомогательным репродуктивным технологиям (ВРТ), в т.ч. ЭКО (экстракорпоральное оплодотворение), ИКСИ (интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида), внутриматочная инсеминация;
  • * неудачные попытки ЭКО;
  • * обнаружение отклонений в спермограмме.

Причины повышенной фрагментации ДНК сперматозоидов

Причины фрагментации ДНК сперматозоидов не до конца изучены. Считается, что основной причиной фрагментации ДНК является оксидативный стресс, а именно повышение в сперме активных форм кислорода (АФК, Reactive oxygen species, ROS). Избыточное количество активных радикалов кислорода способно разрушать фосфолипидные мембраны и генетический материал сперматозоидов. Основным источником активных форм кислорода являются лейкоциты.

Другими внутренними факторами повышения фрагментации ДНК считают неадекватное созревание сперматозоидов (нарушение конденсации хроматина), нарушение дозревания сперматозоидов в придатках яичек и апоптоз (генетически запрограммированная гибель клеток). Важная роль апоптоза состоит в устранении дефектных клеток, у которых разрушается ДНК. Поэтому чем больше отклонений в спермограмме (астенозооспермия, олигоастенозооспермия, олигоастенозооспермия), тем выше уровень фрагментации ДНК сперматозоидов вследствие апоптоза.

Кроме того, существуют и внешние факторы, которые в той или иной степени могут повышать процент фрагментации ДНК сперматозоидов:

  • * возраст (старше 40 лет);
  • * ожирение;
  • * вредные привычки;
  • * высокие температуры (злоупотребление банями/саунами);
  • * хронические/острые воспалительные заболевания мужской мочеполовой системы;
  • * воздействия ионизирующего излучения (лучевая и/или химиотерапия);
  • * варикоцеле (варикозное расширение вен семенного канатика и яичка).
Читайте также:  Антеспондилолистез с4 шейного отдела; Лечение суставов

Где сдать фрагментацию ДНК сперматозоидов?

Наши клиники и лаборатории ЦИР уже 23 года работают в области репродукции. Нам доверяют многие супружеские пары с проблемами бесплодия и невынашивания беременности.

В нашей собственной лаборатории сперматологии мы проводим качественно и быстро до 15 анализов спермы, в том числе и анализ фрагментации ДНК сперматозоидов.

Наши опытные врачи-андрологи и репродуктологи помогут составить план обследования и при необходимости назначить лечение.

Методы фрагментации ДНК сперматозоидов

Прямые методы фрагментации ДНК сперматозоидов – TUNEL, COMET и NT.

К непрямым методам широкое распространены SCSA и SCD (Halosperm).

Метод TUNEL (Transferase mediated dUTP Nick End Labeling). Наибольшей популярностью в настоящее время пользуется этот метод для оценки уровня фрагментации ДНК сперматозоидов. В эякулят добавляется специальное вещество (терминальная трансфераза), после которого разрывы молекул ДНК сперматозоидов прокрашиваются определенным цветом. Под люминесцентным микроскопом проводится подсчет здоровых сперматозоидов, на которые краситель никак не действует (красным цветом), и сперматозоидов с фрагментацией ДНК (зеленым цветом). Преимущество метода заключается в прямом мечении (маркировке) разрывов в ДНК, отсюда следует, что тест имеет высокую чувствительность и специфичность по сравнению с другими методами исследования фрагментации ДНК. Также данный метод позволяет идентифицировать одно- и двухцепочечные разрывы ДНК. Для проведения этой методики необходимо специальное оборудование и высококвалифицированный персонал лаборатории. В нашей Лаборатории ЦИР Вы можете сдать анализ фрагментации ДНК сперматозоидов методом TUNEL.

Рис.3a и 3b. Препараты эякулята под люминесцентным микроскопом. Сперматозоиды с фрагментацией ДНК (зеленым цветом) и сперматозоиды без фрагментации ДНК (красным цветом), окрашенные методом TUNEL.

Метод COMET (Single-cell gel electrophoresis assay, гель-электрофорез единичных клеток) основан на принципах электрофореза, распределяя высоко- и низкомолекулярные ДНК, из которых последняя при электрофорезе напоминает хвост кометы. Чем больше клеток с «хвостом кометы», тем больше имеет место быть фрагментации ДНК. Данный метод высокочувствительный, но требует специального оборудования, не подходящего для использования в клинической лаборатории.

Рис.4. Метод ДНК-комет.

Метод NT (ник-трансляции, ISNT, In-Situ Nick Translation assay) основан на включении радиоактивного тимидина в 3′ -ОН концы фрагментов ДНК с помощью фермента ДНК-полимеразы. В отличие от метода TUNEL данный метод ISNT определяет только одноцепочечные разрывы.

В методах COMET и NT отсутствуют стандарты порогового значения нормы, поэтому они используется только в исследовательских целях.

Метод SCSA (Sperm Chromatin Structure Assay) или определение структуры хроматина по Эвенсону. Это первый разработанный метод определения фрагментации ДНК сперматозоидов. Сначала в образец со сперматозоидами добавляют кислый денатурирующий раствор, а затем специальный краситель акридиновый оранжевый. При связывании красителя с целой двухцепочечной молекулой ДНК наблюдается зеленое свечение, при связывании с разрушенной денатурированной одноцепочечной молекулой ДНК – красное свечение, при наличии умеренной степени повреждения ДНК – желтое свечение. Все это количественно подсчитывается с помощью проточной цитометрии, основой которого является лазерный луч, способный разделить оба типа свечения. Данный метод достаточно высоко чувствителен и специфичен. Сдать фрагментацию ДНК сперматозоидов методом SCSA можно у нас в лаборатории ЦИР!

Метод SCD (Sperm Chromatin Dispersion) или его модификация Halosperm (HALO тест) основан на обнаружении разрывов ДНК по дисперсии хроматина вокруг ядра клетки после гидролиза. Сперматозоиды обрабатывают раствором кислоты, затем после инкубации клетки прокрашивают и просматривают в световом микроскопе. Сперматозоиды, которые содержат целую ДНК, образуют ореол дисперсии («halo-эффект»). Сперматозоиды с фрагментированной ДНК образуют минимальный ореол или не образуют его вообще. Метод прост в использовании, но значительным минусом его является относительно низкая чувствительность и специфичность по сравнению с другими методами исследования фрагментации ДНК.

Рис. 5. Препарат эякулята под световыми микроскопом. Сперматозоиды с целой ДНК (с ореолом дисперсии — «halo-эффект») и сперматозоиды с фрагментированной ДНК (без ореола).

Различают также относительно новый метод исследования фрагментации ДНК – метод DBD-FISH (DNA Break Detection-Fluorescence In Situ Hybridization). В ходе теста сперматозоиды вначале обрабатываются щелочным раствором, который разрушает белки и деспирализует ДНК, а затем средой, содержащей флуоресцентно меченые ДНК-зонды. Зонды связываются с одноцепочечной ДНК. Чем выше степень фрагментации ДНК, тем больше образуется одноцепочечных фрагментов и тем выше степень фрагментации. Этот метод может быть использован для обнаружения повреждения ДНК в определенных областях последовательности генома. В настоящее время технология находится на стадии экспериментального изучения.

Какой метод выбрать ?

Как правило, лечащий врач-андролог при назначении указывает метод исследования фрагментации ДНК сперматозоидов, так как в некоторых клинических случаях может быть предпочтителен тот или иной метод. В остальных случаях пациенту приходится самому выбирать метод анализа, руководствуясь в основном ценой исследования.

В научных исследованиях наибольшую прогностическую значимость с позиции успеха ВРТ показывали методы TUNEL и COMET (L. Simon и др., США, 2014г.; Cissen M. и др., Нидерланды, 2016г.).

В настоящее время наибольшее распространение получил метод TUNEL, так как именно этот метод был использован в большей части исследований, посвященных изучению влияния фрагментации ДНК сперматозоидов на репродуктивные исходы и фертильность.

Прямой метод TUNEL выявляет как одноцепочечные так и двуцепочечные разрывы молекулы ДНК сперматозоидов, таким образом давая больше информации специалисту для оценки вероятности успеха того или иного метода ВРТ.

Что делать если повышен уровень фрагментации ДНК сперматозоидов?

В норме индекс фрагментации должен быть ниже 15%. Всем пациентам с мужским бесплодием, в том числе, ассоциированным с высоким уровнем фрагментации ДНК сперматозоидов, рекомендуется отказаться от вредных привычек и других факторов риска, вести здоровый образ жизни и поддерживать полноценный рацион питания.

При выявлении у пациента с высоким уровнем фрагментации ДНК сперматозоидов с варикоцеле — целесообразна его хирургическая коррекция. К консервативным методам лечения относится назначение антикосидантной терапии и терапии с применением рекомбинантного ФСГ.

Запишитесь к нашим специалистам и получите квалифицированную консультацию по результату анализа, а также рекомендации по лечению при необходимости. Записаться на консультацию в ЦИР

Ссылка на основную публикацию
Фортранс, купить в Самаре от 440 руб, цены в аптеках
Фортранс цены в аптеках Самара Фортранс, 64 г, порошок для приготовления раствора для приема внутрь, 73.69 г, 4 шт. (Ipsen...
Фолликулы в яичниках этапы созревания, воспаление, диагностика и лечение
Фолликулы в яичниках. Норма количество в 30-40-50 лет, при беременности, менопаузе, размеры Способность женщины к беременности определяется фолликулами в яичниках,...
Фолликулярная киста яичника и беременность можно ли забеременеть
Беременность при фолликулярной кисте яичника Фолликулярная киста яичника – это полостное доброкачественное образование, которое располагается внутри органа и заполнено прозрачной,...
ФОСФАЛЮГЕЛЬ или СМЕКТА что лучше и в чем разница (отличия составов, отзывы врачей)
Что лучше «Энтеросгель» или «Фосфалюгель»? Для того чтобы определить какой из данных средств обладает лучшими характеристиками, необходимо сравнить что в...
Adblock detector